Біз сондай-ақ ПТР эксперименттерін жасаймыз, неге нәтижелер әрқашан басқаларға қарағанда әлдеқайда нашар?

Біз сондай-ақ ПТР эксперименттерін жасаймыз, неге нәтижелер әрқашан басқаларға қарағанда әлдеқайда нашар?

Зертханада басқа адамдардың ПТР-ін қараңыз, күшейту тиімділігі жоғары, электрофорез жолағы өте жақсы, ал ұзақ уақыт бойы қиынға соғатын өздеріне қарап, реакция өте жақсы екенін сезіңіз, жалған оң сынақтың нәтижесі ... мәселесі?

Біздің көптеген серіктестеріміз түрлі проблемаларға тап болды деп санаймын. ПТР эксперименттерінде қабырғаға түскенде, біз реакция жүйесіндегі факторларды бейсаналық түрде талдаймыз, бірақ біз эксперименттердегі шығын материалдарының маңызды әсерін жиі елемейміз.

ПТР нәтижесі дұрыс емес, ПТР шығын материалдары маңызды себеп болуы мүмкін. Бір жағынан, шығын материалдарының микро ластануы немесе ингибиторларды енгізу тәжірибелік ластануды тудырады; Екінші жағынан, шығын материалдарының дұрыс таңдалмауы эксперимент нәтижелеріне зиян тигізеді.

Мәселе қайтадан туындайды. ПТР шығын материалдарының көптеген түрлері бар, сондықтан экспериментті тегіс ету үшін дұрысын қалай таңдауға болады? Қандай проблемаларға назар аудару керек? Алаңдамаңыз, бүгінI Көп жылдық тәжірибемен ұштастыра отырып, ПТР шығыс материалдарын таңдау мәселелерін сұрыптай отырып, сізге көмектесуге үміттенемін.

 

1-сұрақ: Неліктен ПТР шығыс материалдары PP материалынан жасалады?

Хуида: ПТР қорлары әдетте реактивтермен немесе сынамалармен тікелей байланыста болатындықтан, полипропилен (PP) материалдары биологиялық инертті, биомолекулаларға жабыспайды және химиялық төзімділік пен температураға төзімділікке ие (121-де автоклаптауға болады). ° C, сонымен қатар жылу циклі кезінде температураның өзгеруіне төтеп бере алады).

 

2-сұрақ: ПТР түтіктерінің / плиталарының әртүрлі өлшемдерін қалай таңдаған жөн?

HUIDA: Іріктеу мақсаты: нақты эксперименттік талаптарға сәйкес өнімді таңдаңыз. ПТР түтігінің көп бөлігі ПТР реакциясының талаптарына жауап бере алады. Осы негізде алдымен аз көлемді түтікті таңдаған жөн. Төмен көлемді реакциялық түтік / пластинаның үстіңгі кеңістігі аз болғандықтан, жылу өткізгіштік жақсарады және булану азаяды. Сонымен бірге, үлгілерді көп немесе тым аз қосудан аулақ болу керек. Тым көп жылу өткізгіштігінің төмендеуіне, төгілуіне және айқас ластануына әкелуі мүмкін, ал шамалысы буланудың жоғалуына әкелуі мүмкін.

Жалпы реакциялық түтіктердің сипаттамалары мен көлемдері:

Бір / аралас түтік: 0,5мл, 0,2мл, 0,15мл

96 құдық тәрелке: 0,2мл, 0,15мл

384 құдық табақ: 0,04 мл

 

3-сұрақ: Үлгі мөлшері аз болған кезде, мен бір құбырлы немесе аралас құбырды таңдаймын, бірақ неге кейбіреулерінде тегіс, ал кейбіреулерінде дөңес қақпақ бар?

Хуида: Үлгінің мөлшері аз болған кезде жалғыз түтікке немесе аралас түтікке артықшылық беріледі. Алайда реакция көлемі үлкен болған кезде жалғыз түтік басым болады және оның көлемі 0,5 мл-ге жетуі мүмкін. Тегіс және дөңес қақпақтың әрқайсысының артықшылығы бар, олар келесі ақпаратқа сілтеме жасай алады.

Бір түтік: 0,2мл және 0,5мл; Үлгінің мөлшерін икемді түрде таңдай алады.

Қосылатын түтік: 0,2 мл немесе 0,15 мл міндетті емес; 8 немесе 12 түтік жиі кездеседі.

Жазық қақпақ: qPCR үшін дәл флуоресценттік сигнал беруін қамтамасыз ете алады; Белгілерді жазу оңай.

Дөңес қақпақ: реакция түтігінің қысым әсерінен деформациясын азайту үшін ПТР құралының ыстық қақпағымен байланыс; Алайда, бұл флуоресценттік сигналдың таралуына әсер етеді және qPCR экспериментіне қолданыла алмайды.

 

4-сұрақ: Неліктен кейбір ПТР плиталарында юбка бар, ал кейбіреулерінде жоқ?

Хуида: Шындығында, ПТР тақтасының юбкасы автоматика қосымшаларына жақсы бейімделуге арналған, бұл құралға тұрақты қолдау мен механикалық төзімділікті, сондай-ақ тамшуыр процесінде жоғары тұрақтылықты қамтамасыз етеді.

ПТР плиталары, әдетте, геминалды емес, жартылай және толық гемлайнды болып бөлінеді.

Онсыз Пластинка: ПТР машиналарының көпшілігіне немесе qPCR машиналарына жарайды, бірақ автоматтандыру қосымшаларына сәйкес келмейді. Пипеткаларды сору процесінде тұрақтылық жоғары болмайды, сондықтан оны пластинаның тіреуімен пайдалану керек.

Жарты юбка жиек тақтасы: жапсырмаға немесе штрих-код қосымшасына және автоматты қолдануға бейімделуі мүмкін және тамшуырдың тұрақтылығы жақсы.

Толық юбка плитасы: автоматтандырылған эксперименттік қосымшаларға өте ыңғайлы, сонымен қатар штрих-кодты жапсырмаға және қолдануға бейімделуі мүмкін. Ол жақсы механикалық беріктігі бар, ПТР доғалы модулінде қолданыла алады және тамшуыр кезінде жоғары тұрақтылыққа ие.

 

Q5 :ПТР табақшалары үшін бұрыштар мен жапсырмалар неге бірдей емес?

Хуида: Бұл бұрыштық кесу мен таңбалаудың әсеріне байланысты.

Бұрышты кесу: ПТР тақтасының бұрыштық кесу жағдайын таңдау оңай орналастыру үшін қолайлы аспаптың талаптарына байланысты.

Сәйкестендіру: ПТР тақтайшаларындағы әріптік-цифрлық маркерлер жекелеген ұңғымаларды және сынамалардың орналасуын анықтауға көмектеседі. Әдетте бедерлі түсті сандық логотипке немесе ойып жазылған логотипке арналған. Кейбір автоматтандырылған қосымшалар үшін басып шығарылған және белгіленген реакциялық плиталар жақсы мөрленеді.

 

6-сұрақ: Неліктен кейбір ПТР тақталары дөңес, ал басқалары тегіс? Қайсысы жақсы?

Хуида: Ең жақсы нәрсе. Кәдімгі ПТР тақтайшаларының екі түрі бар: тегіс кеуекті маржа және жоғары кеуекті шеттер.

Көптеген ПТР аппараттарына жарамды тегіс тесік маржалық реакция тақтасы.

Тесік шеттері көтерілген реакциялық тақталар мембрананың тығыздалуын жеңілдетеді және сынамалар арасындағы айқас ластану қаупін азайтады.

 

Хуида ПТР өнімдерін өндіру және қайта өңдеу саласында көп жылдық тәжірибеге ие және өнеркәсіптің жоғары стандарттарына ие. Өнім желісі бай және ПТР эксперименттік қосымшаларының басым көпшілігін қанағаттандыра алады. Тәжірибелік қосымшаларға сәйкес келетін өнімді таңдаңыз.

谷歌推广疫情产品PCR


Хабарлама уақыты: 03-2021 маусым